客户成就｜山东第一医科大学：自身免疫性葡萄膜炎的分子机制研究
Release time: 2023-06-15
研究背景
自身免疫性葡萄膜炎是一种以眼部炎症损伤为特征的高致盲性眼病，是失明的主要原因之一。B细胞在自身免疫性疾病中发挥重要作用，它通过产生自身抗体，以及抗体非依赖性功能调节免疫细胞应答。然而B细胞的表型、功能及其在自身免疫性葡萄膜炎发病机制中的作用尚不清楚。
研究成果
2023年5月3日，山东第一医科大学林玮团队在《Immunology》杂志上发表题为 “CD83+ B cells alleviate uveitis through inhibiting DCs by sCD83” 的文章，该研究利用免疫荧光结合蔡司激光共聚焦显微成像技术（点击查看），发现了一群具有免疫调节作用的CD83+B细胞，并阐明其在自身免疫性葡萄膜炎中发挥重要调节作用的分子机制。
研究发现：
CD83+B细胞分泌的sCD83作用于树突状细胞（DCs），并与其胞质中Rab1a结合（图1），通过调节静息和活化的DCs中Rab1a在胞质中的定位（图2）影响其下游通路。
在活化的DCs中，Rab1a定位在高尔基体（由高尔基体标记物GM130标记），而sCD83处理的活化DCs中，Rab1a离开高尔基体与LAMP1(溶酶体标记物)和LC3(自噬体标记物)共定位，提示sCD83介导Rab1a从高尔基向自噬溶酶体转移。
活化的Rab1a是DCs中mTORC1磷酸化的关键蛋白，sCD83干扰了Rab1a和p-mTORC1在活化DCs中的共定位（图3）。
实验证实sCD83通过抑制Rab1a介导的mTOR/NLRP3通路，下调DCs代谢水平，以及IL-1β和IL-18分泌，抑制DCs活化。sCD83通过DCs的抑制，进一步抑制了葡萄膜炎中T细胞的活化和功能（图 4）。
▲ 图1 上：sCD83-YFP(绿色)和Rab1a-CFP(红色)质粒共转染DC2.4细胞，利用蔡司共聚焦显微镜检测两者共定位(黄色)
下：sCD83-YFP蛋白同DC2.4细胞孵育24 h，被DC2.4细胞摄取的sCD83-YFP(绿色)与内源性Rab1a(红色)共定位（黄色）。
▲ 图2: 在DC、sCD83处理的DC、活化的DC或sCD83处理的活化DC、Rab1aQ70L过表达的DC和sCD83处理的Rab1aQ70L过表达的DC中，利用蔡司共聚焦显微镜检测Rab1a(绿色)与GM130(红色)、LAMP1(红色)或LC3(红色)的共定位（黄色）。
▲ 图3: 在DC、sCD83处理的DC、活化的DC或sCD83处理的活化DC、Rab1aQ70L过表达的DC和sCD83处理的Rab1aQ70L过表达的DC中，利用蔡司共聚焦显微镜检测Rab1a(绿色)与p-mTORC1(红色)的共定位（黄色）。
▲ 图4：CD83+B分泌sCD83抑制DC活化的作用机制示意图。
综上所述，研究人员使用蔡司激光共聚焦显微镜进行免疫细胞研究，首次报道了具有抑制功能CD83+B细胞可通过分泌sCD83，抑制免疫炎症，并且阐明了sCD83调控DC代谢和炎症因子分泌的分子机制，本文还进一步研究了CD83+B细胞的比例变化与不同类型葡萄膜炎的关系，为该类疾病的诊断治疗提供新思路。
依托于蔡司激光共聚焦显微镜优秀的信噪比和分辨率，可视化反映免疫细胞中蛋白质分子在亚细胞结构中的定位信息，为探秘免疫细胞功能机制提供了有利帮助。
作者信息：
山东第一医科大学临床与基础医学院林玮、山东第一医科大学附属眼科医院刘婷婷与北京大学跨学部生物医学工程系魏勋斌教授为本文通讯作者。山东第一医科大学临床与基础医学院冯萌（研究生）、周淑萍和山东大学齐鲁医院王鑫为本文的共同第一作者。
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